振動圓二色是應(yīng)用廣泛的測定蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的方法,是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡單、較的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測定,較接近其生理狀態(tài)。而且測定方法快速簡便,對構(gòu)象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要手段之一,并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。
振動圓二色是以氣體為流動相,采用沖洗法的柱色譜技術(shù)。當(dāng)自動制樣進(jìn)樣裝置將多組份的分析物質(zhì)推入到色譜柱時,由于各組分在氣相色譜儀色譜柱中的氣相和固定液液相間的分配系數(shù)不同,因此各組份在氣相色譜儀色譜柱的運行速度也就不同,經(jīng)過一定的柱長后,順序離開氣相色譜儀色譜柱進(jìn)入檢測器,經(jīng)檢測后轉(zhuǎn)換為電信號送至數(shù)據(jù)處理工作站,從而氣相色譜儀完成了對被測物質(zhì)全自動的定性定量分析。
該儀器應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。
1、分離混合物:高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
2、生化分析:由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問題Z有前途的方法。
3、儀器聯(lián)用:振動圓二色與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。